2-[[2-Этокси-4-(4-гидрокси-1-пиперидинил)фенил]амино]-5,11-дигидро-5,11-диметил-6H-пиримидо[4,5-b][1,4]бензодиазепин-6-

Описание продукта:

Наименование продукта: 2-[[2-Этокси-4-(4-гидрокси-1-пиперидинил) фенил]амино]-5,11-дигидро-5,11-диметил-6H-пиримидо[4,5-b][1,4]бензодиазепин-6-он CAS NO:1234480-50-2

Синонимы:

XMD 8-92 (свободная база);

6H-Пиримидо[4,5-b][1,4]бензодиазепин-6-он,2-[[2-этокси-4-(4-гидрокси-1-пиперидинил)фенил]амино]-5,11-дигидро-5,11-диметил-;

Химические и физические свойства:

Внешний вид: белый или почти белый порошок

Анализ: ≥98,0%

Плотность:10,3 г/см3

Точка кипения:7410,8°C при 760 мм рт. ст.

Точка вспышки:4020,4°C

В витро

XMD8-92 демонстрирует наибольшее сродство к BMK1 с измеренной константой диссоциации (Kd) 80 нМ, в то время как DCAMKL2, TNK1 и PLK4 демонстрируют Kd?? 190, 890 и 600 нМ соответственно.XMD8-92 профилируется против всех обнаруживаемых киназ в лизатах клеток HeLa с использованием метода KiNativ и обнаруживается примерно в 10 раз более селективным для BMK1 с IC50 1Другие слабые мишени включают домен киназы 2 RSK1 и RSK2, PIK4A и PIK4B и FAK.MEK5 не значительно ингибируется XMD8-92 до 50 мкм[1]. XMD8-92 показывает высокую селективность к BMK1 в лабораторном анализе конкурентного связывания на сайте АТФ против 402 киназ, а также в методе KiNativ против всех обнаруживаемых киназ в лизатах клеток HeLa.XMD8-92 блокирует индуцированную ЭГФ активацию BMK1 с IC50 240 нМ и, при концентрации до 5 мкм, XMD8-92 не оказывает ингибирующего эффекта на активацию ERK1/2 ЭГФ[2].

В живых

XMD8-92 значительно ингибирует рост опухоли in vivo на 95%. Фармакокинетика XMD8-92 оценивается у крыс Sprague-Dawley, которым дается одна внутривенная или пероральная доза.0 ч Клиренс полураспада 26 мл/мин/кгXMD8-92 имеет умеренное распределение в тканях с расчетным объемом распределения 3, 4 л/ кг. XMD8-92 имеет высокую пероральную биодоступность с абсорбцией 69% дозы.После однократной пероральной дозы 2 мг/кг, максимальные концентрации в плазме примерно 500 нМ наблюдаются через 30 минут, оставаясь 34 нМ через 8 ч после приема дозы.высокие концентрации препарата в плазме (примерно 10 мкМ после IP дозировки 50 мг/ кг) сохраняются в течение 14 дней. XMD8-92 хорошо переносится, и мыши выглядели здоровыми без признаков дистресса.Лечение XMD8-92 как у иммунокомпетентных, так и у мышей с иммунодефицитом блокировало рост опухолей легких и шейки матки., соответственно, на 95%. This remarkable anti-tumor effect of XMD8-92 in lung and cervical xenograft tumor models is due to XMD8-92’s capacity to inhibit tumor cell proliferation through the PML suppression-inducted p21 checkpoint proteinКроме того, нокаут BMK1 у мышей приводит к полному и необратимому удалению белка BMK1,В то время как лечение XMD8-92 у мышей только подавляет активность BMK1Во-вторых, нестабильность сосудов, наблюдаемая у мышей BMK1 KO, может быть связана с отсутствием C-терминального некиназного домена BMK1.который по-прежнему присутствует при лечении животных XMD8-92 [2].

Анализ киназы

Профилирование KiNativ XMD8-92 проводится как с АТФ, так и с АДФ ацилфосфат- дестиобиотин с следующими модификациями.Лизаты клеток HeLa (5 мг/мл общего белка) инкубируются в присутствии XMD8-92 при 50 мкМ, 10 мкМ, 2 мкМ, 0,8 мкМ и 0 мкМ в течение 15 минут до добавления АТФ или АДФ ацилфосфатного зонда (5 мкМ окончательной концентрации зонда).Реакции зонды продолжались в течение 10 минут, а реакция была остановлена добавлением мочевины и обработана для анализа МС.. Samples are analyzed by LC-MS/MS on a linear ion trap mass spectrometer using a time segmented “target list” designed to collect MS/MS spectra from all kinase peptide-probe conjugates that can be detected in HeLa cell lysatesДанный целевой список формируется и проверяется путем предварительного исчерпывающего анализа гелализатов.Для извлечения сигналов для каждой киназы используется до четырех характерных ионов фрагмента для каждого конъюгата пептида-пробы киназы, и сравнение ингибитора с контрольными (необработанными) лизатами позволяет точно определить процент ингибиции в каждой точке.В настоящее время готовится рукопись, описывающая подробности этого метода целенаправленной массовой спектрометрии[1].

Администратор животных

Мыши[1] 5×105 гела-клеток ресуспендируют в DMEM и вводят подкожно в правый фланг 6-недельных мышей Nod/Scid (день 0).Мышей рандомизировали на 2 группы (6 животных)., XMD8-92, 1-28 дней, и 18 животных, контроль). Группу XMD8-92 (1-28 дней) лечат XMD8-92 в дозе 50 мг/ кг дважды в день внутрипозвоночно.Контрольная группа получает ежедневные инъекции несущего раствора в качестве контрольной.На седьмой день контрольная группа была рандомизирована на две группы (6 животных, XMD8-92, 7-28 день, и 12 животных, контроль).Остальная контрольная группа рандомизирована на 2 группы (6 животных).Лечение XMD8-92 в группах XMD8-92 (7-28 дней) и XMD8-92 (14-28 дней) начинается соответственно на 7- й и 14- й день.Размер опухоли измеряется с помощью калибра, а объем опухоли определяется[1].

Ссылки:

[1] Ян К, и др. Фармакологическое ингибирование BMK1 подавляет рост опухоли с помощью протеина промиелоцитарного лейкоза. Раковая клетка. 2010 Sep 14;18(3):258-67.

Янг К, и др. Нацеливание на BMK1 MAP киназный путь в терапии рака.

Киназа ALK стимулирует киназу ERK5 для стимулирования экспрессии онкогена MYCN в нейробластоме. Sci Signal. 2014 Oct 28;7 ((349):ra102.

Если вы заинтересованы в наших продуктах или у вас есть какие-либо вопросы, пожалуйста, свяжитесь с нами!

Продукция, на которую распространяется патент, предлагается исключительно в целях НИОКР, однако последняя ответственность лежит исключительно на покупателе.